干燥箱的應(yīng)用-灌注損傷的作用機制分析

    川陳皮素是柑橘皮中一種常見的多甲氧 基黃酮，具有抗氧化、抗炎等作用，常用于治療哮 喘、結(jié)腸炎、阿爾茨海默病、缺血性腦卒中等疾病。 川陳皮素能夠保護心肌缺血再灌注、膿毒癥小鼠肝 損傷。分光光度計（鄭州宏朗儀器設(shè)備有限公司），鼓風(fēng)干燥箱GZX-90770MBE(上海博迅),酶 標(biāo)儀、顯微鏡（美國 Thermo Fisher Scientific 公司）； 透射電子顯微鏡（TEM，日本電子株式會社）；熒 光顯微鏡（日本 Olympus 有限公司）。SD 大鼠隨機分為對照組、 模型組和川陳皮素（10 mg/kg）組，每組 10 只。大 鼠禁食 12 h，自由飲水，模型組和川陳皮素組大鼠 ip 氯胺酮（25 mg/kg）麻醉，打開腹腔，充分暴露 肝門，用非創(chuàng)傷性血管鉗夾閉肝蒂的左、中支，當(dāng) 肝臟顏色從鮮紅色變?yōu)樯钭仙珪r，缺血 45 min，然 后取下夾子進行肝臟血液再灌注；對照組大鼠僅打 開腹腔，暴露肝門。川陳皮素溶于含 0.5%聚山梨酯 80 的生理鹽水中，配制成質(zhì)量濃度為 10 mg/mL 的 溶液，造模前 30 min 川陳皮素組 ip 川陳皮素，對 照組和模型組 ip 等體積含 0.5%聚山梨酯 80 的生理 鹽水。HIRI 6 h 后肝功能發(fā)生明顯損害，大鼠脫 頸椎處死，取血和肝組織。

    川陳皮素對大鼠缺血后氧化應(yīng)激的 產(chǎn)生具有一定的療效；川陳皮素對神經(jīng)細胞氧化 損傷具有保護作用。本研究結(jié)果顯示，川陳皮素 可減少 H2O2 誘導(dǎo)的 BRL 細胞中自噬蛋白與線粒體 的共定位數(shù)量，表明川陳皮素可以逆轉(zhuǎn)氧化損傷后 線粒體產(chǎn)生的變化。本研究采用自噬抑制劑 3-MA 和自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素，驗證川陳皮素是否通過調(diào) 控線粒體自噬過程保護肝細胞，發(fā)現(xiàn)川陳皮素可改 善 BRL 細胞氧化損傷，雷帕霉素可抑制川陳皮素對 BRL細胞氧化損傷的改善作用，3-MA（1、5 mmol/L） 可增強川陳皮素對 BRL 細胞氧化損傷的改善作用， 3-MA（10 mmol/L）抑制川陳皮素對 BRL 細胞氧化 損傷的改善作用。